ImageJ是功能十分强大的图像分析软件，这里主要介绍ImageJ软件测量细胞累积荧光强度的具体操作流程。

软件下载安装

• 后台回复200512获取网盘下载链接，下载后解压，软件为免安装版，将解压后的文件夹移动到想要安装的位置即可，然后双击下图红框中的文件打开软件（可将该文件发送快捷方式到桌面，方面下次打开）。
  

荧光强度测量

打开图片

• 点击File→Open,打开要测量的荧光图片；如果直接用file-open的方法打不开图像，点住图片，鼠标左键按住不放，拖到ImageJ工具栏里，直到鼠标指针下方出现虚线框，放开左键，图像就打开了；
  

转换图片格式

• 在工具栏依次点击Image→Type→16-bit；
  

设置需要测量的参数

• 依次点击Analyze→Set Measurements；

• 如下图所示，勾选测量对象：①面积（Area），②平均灰度值（Mean），③累积光密度（IntDen），然后点击OK；
  

打开ROI窗口

• 依次点击Analyze→Tools→ROI Manger；
  

在荧光图上选择测量对象（带荧光的细胞以及背景）并计算

• 点击主界面的套索工具；
  

• 点击已打开的荧光图，用套索工具在图上圈出一个荧光细胞的轮廓；
  

• 在ROI Manger界面点击Add，框2会出现一个对象，点击选中后点Rename，重命名对象。此例中按顺序重命名为1，点击OK；
  

• 按照上一步的方法继续使用套索工具在荧光图上勾选多个测量对象，并按顺序命名，此例中勾画了六个待测荧光细胞对象和三个背景对象，背景对象用于后续扣除背景值；
  

• 勾画完对象后，在ROI Manger界面中，按shift键选中所有测量对象，然后点击Measure；
  

• 点击Measure后，即弹出Results框。
  

整理数据

• 将得到的结果拷贝到Excel表中，求出背景7、8、9的平均光密度，再求出校正后的累积光密度（校正后的累积光密度=累积光密度-待测细胞面积*背景平均光密度）；
  

• 介绍完毕。

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